ژنهایTFRC و ACTB به عنوان ژن مرجع مناسب برای اندازه گیری بیان ژن فعال‌ساز پلاسمینوژن یوروکیناز (uPA) در سرطان پستان

نویسندگان

  • اسمعیلی, رضوان مرکز تحقیقات سرطان پستان جهاددانشگاهی واحد علوم پزشکی تهران
  • عبدلی, نسرین مرکز تحقیقات سرطان پستان جهاددانشگاهی واحد علوم پزشکی تهران
چکیده مقاله:

  مقدمه: سرطان پستان شایعترین سرطان در میان زنان در سراسر جهان است. مدتهای طولانی محققان به دنبال یافتن راههایی برای تشخیص و درمان سرطان در مراحل اولیه‌ بوده‌اند. تحقیقاتی که به منظور توسعه استفاده از نشانگرهای زیستی صورت گرفته‌اند در تشخیص و درمان سرطان پستان بسیار مؤثر بوده و منجر به کاربردی شدن برخی از این نشانگرها در نزد بیماران شده است. روش‌های جاری در اندازه‌گیری نشانگرهای زیستی مانند ایمونوهیستوشیمی، ایمونوسیتوشیمی و الایزا روش‌های مورد تأیید و تکرار‌پذیر در آزمایشگاههای مختلف هستند اما نتایج غیرکمی و مراحل کار متعدد و طولانی از نقاط ضعف این تکنیک‌ها است که محققان را به جستجو در مورد روشهای جایگزین مولکولی مانند (Q-RT-PCR)Quantitative Real-Time PCR تشویق می‌کند. تایید نهایی اعتبار این روش برای استفاده در آزمایشگاه های تشخیصی نیازمند اعتبارسنجی‌های متعدد از جمله در مورد ژن‌های خانه­دار (Housekeeping genes) می­باشد.   روش بررسی: شش ژن خانه‌دار که به طور معمول در سرطان پستان استفاده شده است ( RPLP0, HPRT1, ACTB, GAPDH , GUSB , TFRC )، انتخاب و پایداری بیان آنها برای نرمال کردن بیان ژن uPA ، مورد بررسی قرار گرفت . واکنش Q-RT-PCR با استفاده از Master Mix 2x از شرکت ‌ PrimerDesign در واکنش‌های 20 میکرولیتری انجام شد. غلظت نهایی پرایمرها و پروب‌ها به ترتیب 5/0 میکرومولار و 3/0 میکرومولار بود. اندازه‌گیری میزان فلورسانت توسط دستگاه Applied Biosystems 7500 و آنالیز داده‌ها توسط نرم‌افزار 7500 software system ver.2.0 انجام شد. به منظور یافتن پایدارترین ژن‌ خانه‌دار، داده‌ها ابتدا توسط نرم افزار Excel به مقیاس خطی تبدیل شد. سپس داده‌ها توسط نرم‌افزار geNorm [20] با روش Pair wise comparison و با استفاده از نرم‌افزار NormFinder [22] با روش combined estimate of The intra and inter group validation آنالیز شد.   یافته­ها: در این مطالعه RPLP0 و GAPDH بیشترین مقدار M و TFRC کمترین مقدار را داشت. (شکل 1) در این مطالعه TFRC بیشترین پایداری بیان را نشان داد. در این مطالعه میزان V برای استفاده از سه و چهار کنترل داخلی به ترتیب 5/0 و 4/0 بود.   نتیجه گیری: بر اساس این مطالعه ژن TFRC ،پایدارترین ژن کنترل و ترکیب TFRC و ACTB بهترین ترکیب دو ژنی برای نرمال‌سازی uPA در سرطان پستان است. لازم به ذکر است که ژنهای RPLP0 و GAPDH به عنوان رفرانس مناسب توصیه نمی‌شود.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

ژنهایtfrc و actb به عنوان ژن مرجع مناسب برای اندازه گیری بیان ژن فعال ساز پلاسمینوژن یوروکیناز (upa) در سرطان پستان

مقدمه: سرطان پستان شایعترین سرطان در میان زنان در سراسر جهان است. مدتهای طولانی محققان به دنبال یافتن راههایی برای تشخیص و درمان سرطان در مراحل اولیه بوده اند. تحقیقاتی که به منظور توسعه استفاده از نشانگرهای زیستی صورت گرفته اند در تشخیص و درمان سرطان پستان بسیار مؤثر بوده و منجر به کاربردی شدن برخی از این نشانگرها در نزد بیماران شده است. روش های جاری در اندازه گیری نشانگرهای زیستی مانند ایمونو...

متن کامل

اندازه گیری میزان بیان ژن mmp-۹ برای ارزیابی بهبودی بیماران مبتلا به سرطان پستان

مقدمه: ماتریکس متالو پروتئینازها-9 (mmp-9) آنزیمی با فعالیت پروتئازی است که تاکنون عملکرد آن در ایجاد چندین سرطان گزارش شده است. با توجه به رابطه مقدار فعال این آنزیم و سرطانی شدن سلول­ها در این مطالعه ما به بررسی میزان پلاسمایی این آنزیم در بهبود یا پیشرفت و متاستاز بیماری سرطان پستان پرداختیم. مواد و روش­ها: در این مطالعه میزان بیان mmp-9 در پلاسمای نمونه خون گرفته شده از 98 بیمار دارای سرطان...

متن کامل

کاهش بیان ژن BACH2 در نمونههای پارافینه بافت سرطان پستان به عنوان یک تنظیم کننده رونویسی در سرطان

مقدمه: سرطان پستان، یکی از دلایل اصلی مرگ‌و‌میر در زنان می­باشد. ژن BACH2 برای تنظیم تکوین و عملکرد انواع سلول­های ایمنی (سلول B، T و ماکروفاژ) نیاز می­باشد. ژن BACH2 یک لوکوس مستعد کننده غالب برای چندین بیماری خودایمن و آلرژی می­باشد، با این وجود بیان و عملکرد بالقوه BACH2 در سرطان پستان هنوز مشخص نشده است، لذا مطالعه حاضر با هدف بررسی بیان ژنی BACH2 در نمونه­های توموری پستان انجام شد. روش کا...

متن کامل

نقش بیان ژن یوبیکوئیتین D (UBD) در پیش‌آگهی سرطان پستان

Background: Breast cancer is the most common non- skin cancer among women and it’s the second leading cause of cancer related death in women. Ubiquitin and ubiquitin like proteins are member of signal transduction pathways which have several cellular functions. It has shown that Ubiquitin like protein D (UBD) has accelerated the cancer progress. The aims of this study is evaluation of UBD gene ...

متن کامل

اندازه گیری بیان ژن گیرنده پروژستروندر بافت سرطانی و سالم پستان انسان به روش Real-time PCR

مقدمه: پیشرفت در ژنتیک مولکولی و عوامل تشخیص سرطان پستان در فهم بهتر زیست شناسی تغییر و تبدیل بافت سالم پستان به بافت سرطانی با خصوصیات تهاجمی و متاستاتیک کمک می کند. هدف این تحقیق به کارگیری روش قدرتمند Real-time PCR نسبی مبتنی بر سایبرگرین جهت اندازه گیری نسبی بیان ژن گیرنده پروژسترون A در انسان می باشد. روش کار: 10 نمونه بافت طبیعی و 20 نمونه بافت سرطانی پستان (درجه2) قبل از درمان و بدون آلو...

متن کامل

بررسی بیان ژن KLF4 به عنوان یک مارکر مولکولی جدید در تومورهای سرطانی پستان

Introduction: Krupple-like factor4 is a transcription factor which is involved in many cancers including Breast cancer. Breast cancer is the most common malignancy among women. Due to the high prevalence of these tumors, there are ongoing efforts to find molecular markers which can recognize nontumoral from tumoral tissues. Therefore, the aim of this study was to evaluate the potential usefulne...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


عنوان ژورنال

دوره 3  شماره 3

صفحات  7- 15

تاریخ انتشار 2010-10

با دنبال کردن یک ژورنال هنگامی که شماره جدید این ژورنال منتشر می شود به شما از طریق ایمیل اطلاع داده می شود.

کلمات کلیدی

کلمات کلیدی برای این مقاله ارائه نشده است

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023